基因擴增PCR污染的預防與控制

   基因擴增PCR實驗室設計的核心問題是如何避免污染。在實際工作中，常見的有以下幾種污染類型：擴增產物的污染；天然基因組DNA的污染；試劑的污染以及標本間的污染。由于一旦發生污染，實驗就須停止，直到找到污染源為止，而且實驗結果須作廢，需重新進行實驗。所以發生污染后再圍繞實驗室來尋找污染源不但耗時而且繁瑣，浪費人力物力。因此要避免污染，應是預防，而不是排除。

1.工作區域的嚴格劃分

    （1）各個實驗區域設置合理；

    （2）各個實驗區域要有明顯的標記（如醒目的門牌或不同的地面顏色等），以避免各個不同實驗區域設備物品、試劑等發生混淆。

2.合理的系統設置

    （1）合理的空調通風系統設置，盡量采用全送全排的空調系統；

    （2）嚴格的氣流壓力控制，保證不同的實驗區內不同的壓力要求。

3.規范的操作

    （1）臨床基因擴增PCR檢驗實驗室的技術人員須進行上崗培訓，經培訓合格后才能從事臨床基因擴增檢驗的工作；

    （2）在實驗操作過程中，操作者須戴手套，并經常更換。此外，操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止污染的措施；

    （3）清潔工作及時、正確。實驗工作結束后，必須立即對本區進行清潔。除常規的消毒液體對表面進行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外，對一些實驗設備還應進行高壓消毒處理。

4.嚴格的管理

    （1）嚴格控制進出實驗室的人員。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室，有條件的情況下要設置獨立的通道和進出整個實驗區的門；

    （2）在各個實驗區域使用帶有明顯區別標志的工作服（如不同顏色），當工作人員離開時不得將本區的工作服帶至其它區域；

    （3）盡量減少在實驗區內不必要的走動以減少交叉污染的可能性。

    （4）擴增產物分析區是主要的擴增產物污染來源，廢液不能在實驗室中傾倒，經消毒液浸泡消毒后在遠離實驗室的地方棄掉，用過的吸頭等一次性材料也應經消毒液浸泡消毒后統一處理，如焚燒等；

    （5）擴增產物分析區可能會用到某些可致基因突變和有毒物質，應特別注意實驗人員的安全防護。

5.完備的實驗室配套設施

    完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件，應根據各個實驗室實驗內容的不同配備相應的設備和儀器，如超凈工作臺、離心機、加樣器等。